为什么做实验都用酒精不用白酒，为什么做皮试的时候不用酒精擦一下就直接进行皮内试验

是她忘了涂酒精了，一般只要是有创的操作都有消毒表皮的。可能你被个忘性很大的护士…………

你好！易致局部皮肤发红一般情况下皮试多采用75％酒精消毒局部皮肤表面，影响皮试观察结果。可以用生理盐水替代，而酒精具有扩张血管的作用仅代表个人观点，不喜勿喷，谢谢。

（1）①200；②225；（2）不能，理由见解析.试题分析：（1）①根据二次函数的最值求解即可.②根据点在曲线上点的坐标满足方程的关系，将（5，45）代入即可求得k的值．（2）求出时（即酒精含量等于20毫克／百毫升）对应的x值（所需时间），推出结论．试题解析：（1）①当时，，∴喝酒后1时血液中的酒精含量达到最大值，最大值为200毫克／百毫升.②∵当时，，且（5，45）在反比例函数(k＞0)图象上，∴把（5，45）代入得，解得.（2）把代入反比例函数得.∴喝完酒经过11.25时（即11：20时）为早上7：20.∴第二天早上7：20以后才可以驾驶，7：00时不能驾车去上班.

无水乙醇的制备相当复杂，操作困难，直接导致无水乙醇的价钱比95乙醇的价钱高好多，在是在这个实验当中，有专门的除水过程，5%的水对实验没有多大的影响！

也许是无水乙醇过于容易挥发，而制作乙酸乙酯要加热，所以用95%乙醇

无水乙醇在价格上要比95%的乙醇贵很多，因此很多实验室为了节约成本，就多半用95%的乙醇，当然用无水乙醇也可以

最主要的原因是因为，无水乙醇价格高。化学合成中对原料的要求并不高，用普通的化学纯药品即可，不需要纯度更高的试剂纯或分析纯，95%乙醇价格便宜，易于制得。

70%～75％的酒精而不用纯酒精消毒呢？这是因为酒精浓度越高，使蛋白质凝固的作用越强。当高浓度的酒精与 细菌接触时，就能使菌体表面迅速凝固，形成一层包膜，阻止了酒精继续向菌体内部渗透。细菌内部的细胞没 能彻底杀死。待到适当时机，包膜内的细胞可能将包膜冲破重新复活。因此，使用浓酒精达不到消毒杀菌的目 的。如果使用70%～75％的酒精，既能使组成细菌的蛋白质凝固，又不能形成包膜，能使酒精继续向内部渗透， 而使其彻底消毒杀菌。经实验，若酒精的浓度低于70％，也不能彻底杀死细菌

为什么不用纯酒精消毒?酒精能渗入细菌体内，使组成细菌的蛋白质凝固。所以酒精在医疗卫生上常用它作消毒杀菌剂。为什么用 70%～75％的酒精而不用纯酒精消毒呢？这是因为酒精浓度越高，使蛋白质凝固的作用越强。当高浓度的酒精与 细菌接触时，就能使菌体表面迅速凝固，形成一层包膜，阻止了酒精继续向菌体内部渗透。细菌内部的细胞没 能彻底杀死。待到适当时机，包膜内的细胞可能将包膜冲破重新复活。因此，使用浓酒精达不到消毒杀菌的目 的。如果使用70%～75％的酒精，既能使组成细菌的蛋白质凝固，又不能形成包膜，能使酒精继续向内部渗透， 而使其彻底消毒杀菌。经实验，若酒精的浓度低于70％，也不能彻底杀死细菌

观察根尖细胞的有丝分裂（95%酒精和15%盐酸1：1混合形成的解离液）用卡诺氏液的那个实验也需用上述的解离液还有提取叶片中色素需用无水乙醇观察脂肪的实验需用50%酒精去除浮色

观察细胞中的油脂（苏丹3染色），染色后用酒精洗去浮色。色素的提取分离，用酒精提取（也就是溶解）色素。观察洋葱根尖细胞有丝分裂，酒精是解离固定液的主要成分之一。

色素的提取和分离实验中用无水乙醇或体积分数为95%的乙醇，作用是提取色素的。有丝分裂中解离液是盐酸和酒精混合液1:1比例，作用是使组织中的细胞相互分离开来

叶绿体色素的提取和分离实验中，作用是提取色素的；DNA的粗提取与鉴定实验，酒精用于“DNA的析出”那一步，用于除去溶于酒精的蛋白质（DNA不溶于酒精）；观察根尖分生组织细胞的有丝分裂实验，解离时用到的解离液是：质量分数为15%的HCl与体积分数为95%的酒精，比例为1：1；低温诱导植物染色体数目的变化实验中，固定后用体积分数为95%的酒精冲洗，解离时同上。

观察根尖细胞的有丝分裂（95%酒精和15%盐酸1：1混合形成的解离液）用卡诺氏液的那个实验也需用上述的解离液还有提取叶片中色素需用无水乙醇观察脂肪的实验需用50%酒精去除浮色

那个研究叶子里的色素的时候是要用到的胡萝卜素，叶黄素，叶绿素a，叶绿素B是可以溶解在酒精中的

直接免疫荧光实验为什么加酒精免疫荧光细胞化学方法的原理是根据抗原抗体反应的规律，把已知的抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗原或抗体，然后以它作为探针来检测组织或细胞内的相应物质。方法具体种类有直接法、间接法、夹心法和补体法等。1、冰冻切片制备：建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。2、组织切片固定：切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定 5-10 min，尤其要较长时间保存的白片，一定要及时固定和适当保存。3、血清封闭：为防止内源性非特异性蛋白抗原的结合，需要在一抗孵育前先用血清（与二抗来源一致）封闭，减弱背景着色。血清封闭的时间是可以调整的，一般 10-30 min。4、一抗孵育条件：在免疫组化反应中最重要，包括孵育时间和抗体浓度。一抗孵育温度有几种：4℃ 、室温、37℃ ，其中 4℃ 效果最佳；孵育时间：这与温度、抗体浓度有关，一般 37℃ 1-2 h，而 4℃ 过宿和从冰箱拿出后 37℃ 复温 45 min。具体条件还要摸索。5、二抗孵育条件：二抗一般室温或 37℃ 立即观察，若将标本放在聚乙烯塑料袋中 4℃ 30 min-1h，具体时间需要摸索，而浓度一般有工作液，若是浓缩液还要摸索浓度，切记要避光反应。但在免疫荧光中我们一般先把二抗浓度和孵育时间先定下，然后去摸索一抗浓度和孵育时间。最后，荧光素标记的二抗随着保存时间的延长，可能后有大量的游离荧光素残留，需要注意配制时小包装和并进行适当的离心。6、复染：目的是形成细胞轮廓，从而更好地对目标蛋白进行定位。一般常用 DAPI 复染。7、封片：为了长期保存，我们一般用缓冲甘油等封片，此外还有专门的抗荧光萃灭封片液。避免产生气泡，方法是直接在载玻片组织上滴一滴封片液，然后一手拿住盖片某一拐角，而另一手拿对面的那个拐角，接近封片液近端的拐角先降低，直至接触到液体时为止；当发现液体接触面在不断弥散时，则可以缓慢降低另一拐角，这样一般不会产生气泡。8、切片清洗：为了防止一抗、二抗等试剂残留而引起非特异性染色，所以适当地加强清洗（延长时间和增多次数）尤为重要，我一般在一抗孵育前的清洗是 3 min*3 次，而一抗孵育后的清洗均为 5 次*5 min。注意：单独冲洗，防止交叉反应造成污染。温柔冲洗，防止切片的脱落。我喜欢用浸洗方式；冲洗的时间要足够，才能彻底洗去结合的物质。PBS 的 pH 和离子强度的使用和要求。这方面我有惨痛教训，当时我买的抗体稀释液偏酸，结果背景一片黄（未见特异性染色），建议 pH 在 7.4-7.6 浓度是 0.01 M。（中性及弱碱性条件（pH7-8）有利于免疫复合物的形成，而酸性条件则有利于分解；低离子强度有利于免疫复合物的形成，而高离子强度则有利于分解）9、拍照：有条件的话最好立即拍照，若不能及时拍照，也要封好片和用指甲油封固，保持避光和湿度。使用荧光显微镜注意严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作，不要随意改变程序；应在暗室中进行检查；防止紫外线对眼睛的损害，在调整光源时应戴上防护眼镜；检查时间每次以1~2 h 为宜，超过 90 min，超高压汞灯发光强度逐渐下降，荧光减弱；标本受紫外线照射 3~5 min 后，荧光也明显减弱或褪色；激发光长时间的照射，会发生荧光的衰减和淬灭现象；所以最多不得超过 2~3 h；荧光显微镜光源寿命有限，标本应集中检查，以节省时间，保护光源。天热时，应加电扇散热降温，新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再启用时，须待灯光充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。关闭汞灯至少在开启 15-30 分钟后；标本染色后立即观察，因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中 4℃ 保存，可延缓荧光减弱时间，防止封裱剂蒸发；使用的玻片等载体，都必须厚度均匀，无明显的自发荧光，如果使用油镜，还必须保证镜油为无荧光镜油；电源最好装稳压器，否则电压不稳不仅会降低汞灯的寿命，也会影响镜检的效果。

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